Fluorescence microscopy: fitsipiky ny fomba

Hisakana ny fiasan'ireny sy ny re-émission bebe kokoa ny hazavana sy ny organika inorganic tsiranoka dia vokatry ny phosphorescence na fluorescence. Ny fahasamihafana eo amin'ny tranga dia ny faharetan'ny ny nanelanelana hisakana ny fiasan'ireny sy ny émission ny mazava marary mitsika. Rehefa ny fluorescence ireo dingana efa miara mitranga, raha mbola phosphorescence - ny sasany ela.

fanazavana ara-tantara

Tamin'ny 1852, mpahay siansa britanika Stokes, voalohany Nilaza fluorescence. Nampiditra teny vaovao toy ny vokatry ny fanandramana amin'ny fluorspar, izay ataon-drizareo jiro mena eo ambany ultraviolet. Stokes nanamarika ny tranga mahaliana. Izany no ahitana fa ny halavan'ny onjam-taratra ny fluorescent foana lehibe noho ny fikorianan'ny ny excitation mazava.

Mba hanamarinana ny petra-kevitra ao amin'ny taonjato faha-19 dia efa maro ny fanandramana. Nampiseho fa izy ireo isan-karazany ny santionany fluoresce eo ambany fitarihan'ny ny ultraviolet. Anisan'ireo fitaovana, ankoatra ny zavatra hafa, efa kristaly, resins, mineraly, famaitso, hiteny ratsy ny zava-mahadomelina, inorganic Kamban-teny, vitaminina, menaka. Ny fampiasana mivantana ny loko ho an'ny fitsirihana biolojika nanomboka tamin'ny 1930 ihany

Fluorescence microscopy: famaritana

Ny sasany amin'ireo fitaovana ampiasaina ao amin'ny tapany voalohan'ny taonjato faha-20 fanadihadiana nampiseho specificity avo. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. Noho ny fampisehoana, izay tsy mety ho tratra amin'ny alalan'ny fomba mifanohitra, ny fomba fluorescence microscopy dia lasa fitaovana manan-danja eo amin'ny biomedical sy niteraka fikarohana. Vokatra manan-danja koa dia nahazo sy ny fitaovana.

? Inona no tombontsoa manao ny fomba fluorescence microscopy? Mampiasa fitaovana vaovao dia lasa azo atao sy ny fifantenana ny tena manokana submicroscopic cellule singa. Fluorescence microscopy mpitovo dia afaka mahita molekiola. Ny loko isan-karazany ny mamela ny famantarana ny amin'ny zavatra maro indray mandeha. Na dia eo aza ny maka sary voafetra famahana ny diffraction voafetra ny fitaovana, izay, kosa, dia miankina amin'ny fananana manokana ny santionany, ny famantarana ny molekiola ambaratonga ambany ity koa tena azo atao. Various levitra taorian'ny fampirantiana irradiation autofluorescence. Io tranga io Nampiasaina be teo amin'ny petrology, zavamaniry, ny Semiconductor orinasa.

endri-javatra

Halalino biby sela na otrikaretina matetika sarotra, na tsy manan-kery loatra na tena matanjaka unspecific autofluorescence. Na izany aza, ny zava-dehibe eo amin'ny fianarana mahazo fampidirana ho ao an-zavatra singa po amin'ny iray manokana sy ny halavan'ny onjam emitting ny fahazavana ilaina mikoriana mafy. Fluorochromes miasa toy ny loko tsy miankina afaka miraiki-po rafitra (hita na tsy hita maso). Dia toy izany no manana selectivity avo ho an'ny lasibatra, ary atsangana hitondra vokatra.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. Fluorescence microscopy dia be nampiasaina hatramin'ny fahatongavan'ny loko voajanahary sy synthetic. Izy ireo nahazo hamafiny sasany mombamomba ny émission sy ny excitation, ary lasibatra manokana niteraka lasibatra.

Famantarana ny tsirairay molekiola

Matetika, amin'ny toe-javatra tsara, dia afaka misoratra anarana ny singa samihafa hazavana. Noho izany, ankoatra ny zavatra hafa, dia ilaina ny manome ny ampy ambany feon'ny ny detector sy ny Optical fototra. Fluorescein molekiola ny tsy fahombiazana noho ny photobleaching afaka ataon-drizareo hatramin'ny 300 arivo sy iray alina. Photons. Tamin'ny 20% fanangonana fahombiazana ny dingana azy ireo ary afaka misoratra anarana ao amin'ny habetsahan'ny tokony ho 60 arivo.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. Fluorescence microscopy miorina amin'ny riaka photodiodes na elektronika fampitomboana, namela ny mpikaroka mba hitandrina ny fitondran-tena ny molekiola tsirairay ny alalan 'ny faharoa, ary indraindray na dia minitra.

pitsiny

Ny olana manan-danja izay manohana ny fanafoanana ny Optical tabataba afara. Noho ny zava-misy fa maro amin'ireo fitaovana ampiasaina ao amin'ny famolavolana ny sivana sy ny Mitovy amin'ilay family mbola hanehoana autofluorescence ny sasany, ny ezaka ataon'ny mpahay siansa raha vao manomboka miaraka dia miompana amin'ny famokarana ny singa manana fluorescence ambany. Na izany aza, manaraka fanandramana no nitarika ho amin'ny fanatsoahan-kevitra vaovao. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. Indrindra indrindra, dia hita fa fluorescence microscopy, mifototra amin'ny fandinihana anatiny tanteraka, dia mamela ny fanatratrarana ny ambany sy ny ambony fototra excitation mazava ny hamafiny.

rafitra

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. Ny fitsipiky ny fluorescence microscopy, mifototra amin'ny fandinihana anatiny tanteraka dia ny fampiasana ny evanescent onja na evanescent. Izany mitranga amin'ny sisin eo amin'ny haino aman-jery samy hafa refractive indices. Amin'ity tranga ity, ny mazava andry mandalo ny Prism. Izany dia avo refractive fanondroana fikirana.

The Prism mifanakaiky amin'ny aqueous vahaolana na ny fitaratra amin'ny fikirana ambany. Raha ny andry ny hazavana izany mivantana amin'ny Amin'ny zoro izay kokoa fanakianana, ny andry dia hita taratra tanteraka avy amin'ny interface tsara. Ity trangan-javatra, kosa, mahatonga nonpropagating onja. Amin'ny teny hafa, ny saha izay niteraka herinaratra miditra ho mpanelanelana amin'ny Fanondroana refractive ambany lavitra fikirana ho latsaky ny 200 nanometers.

Ny onja evanescent hamafin'ny ny mazava ho ampy ny manaitaitra fluorophores. Na dia izany aza, noho ny tena kely ny ambany, ny boky dia ho kely indrindra. Ny vokatra azo dia ambany lenta fototra.

fanovana

Fluorescence microscopy dia mifototra amin'ny fandinihana anatiny tanteraka, dia azo ampiharina amin'ny epi-hazavana. Izany dia mitaky Mitovy amin'ilay family mbola avo nisara-isa (fara fahakeliny, 1.4, nefa mahafinaritra fa nahatratra 1.45-1.6), ary nanazava ny ampahany saha fitaovana. Ity farany dia tratra amin'ny toerana kely habe. Hitovy bebe kokoa mampiasa manify peratra fanombohany, izay dia voasakana 'ny ampahany ny renirano. Fa ny mitsikera fiolahana, avy eo misy ny fisaintsainana tanteraka, dia mila avo lenta ny refraction ny asitrika mpanelanelana ao amin'ny family sy ny rakotra fanaovam-panavotana vera amin'ny mikraoskaopy.